Valutazione del differenziamento di cellule di carcinoma del colon per la messa a punto di un modello di assorbimento intestinale in condizioni dinamiche

La tesi è incentrata sullo studio del differenziamento della linea cellulare Caco-2. Il vantaggio principale delle Caco-2 risiede nella capacità intrinseca di differenziarsi spontaneamente, una volta giunte a confluenza, in un monolayer di cellule, le quali acquisiscono le caratteristiche funzionali e morfologiche degli enterociti maturi. Esse sono in grado di formare giunzioni strette (tight junctions) tra le cellule, acquisiscono un grado di polarizzazione e presentano un’elevata resistenza elettrica. E' stato messo a punto un modello mediante LiveBox2, valutando l'assorbimento di una sostanza, l'atenololo, dopo 15 giorni, simulando ciò che avviene in vivo. L'analisi mediante HPLC ha confermato i risultati ottenuti mediante analisi di TEER, di FITC-DEXTRAN e della ricerca di marcatori di differenziamento (E-caderina e N-caderina) attraverso la Real time PCR. In futuro saranno testate altre sostanze, nell'ottica di ridurre-sostituire-rifinire l'uso degli animali nella ricerca.