Determinazione del titolo dei principi attivi di un prodotto farmaceutico liofilizzato e del relativo diluent: convalida dei metodi analitici HPLC

This thesis aims to validate the analytical methods for determining the assay of a lyophilized pharmaceutical product and its diluent. Specifically, the product referred to is a drug developed whose aim is counteracting a condition known as sensorineural hearing loss, or SNHL, which affects over 90% of all people with hearing loss. Its functioning is aimed at activating the progenitor cells present in the ear in order to regenerate the damaged hearing ones and thus improve hearing function. The product referred to is presented as lyophilized and is reconstituted through a diluent solution. The validation of an analytical procedure is the process by which it is established, through targeted laboratory tests, that the performance of an analytical procedure meets the requirements for the intended applications. In this regard, the use of statistical methodologies is fundamental. The validation of the analytical methods discussed in this thesis includes the evaluation of specific technical parameters, namely: Accuracy, Precision, Specificity, Limit of Detection, Limit of Quantitation, Linearity, Range. The analytical methods have been developed in HPLC, that is a chromatographic technique that allows to separate compounds present in a solvent by exploiting the affinity balance between a stationary phase, placed inside the chromatographic column, and a mobile phase flowing through it. The chromatograms obtained from the analyses are then processed through specific software (Empower) and the results processed and compared with the acceptance criteria in order to determine the outcome of the validation. The thesis internship was carried out at the Monza site of the Thermo Fisher Scientific company within the Pharmaceutical Development Service (PDS) group.

La presente tesi si pone come obiettivo quello di convalidare metodi analitici per la determinazione del titolo di un prodotto farmaceutico liofilizzato e del relativo diluent. Nello specifico il prodotto cui si fa riferimento è un farmaco sviluppato con l’obiettivo di contrastare una condizione nota come perdita dell'udito neurosensoriale, o SNHL, che colpisce oltre il 90% di tutte le persone affette da ipoacusia. Il suo funzionamento è volto ad attivare le cellule progenitrici presenti nell'orecchio al fine di rigenerare quelle uditive danneggiate e migliorare, quindi, la funzione uditiva. Il prodotto cui si fa riferimento si presenta come liofilizzato ed è ricostituito attraverso una soluzione diluent. La convalida di una procedura analitica è il processo mediante il quale si stabilisce, attraverso test mirati di laboratorio, che le performance di una procedura analitica soddisfa i requisiti per le applicazioni previste. Fondamentale, a tal proposito, è l’uso di metodologie statistiche. La validazione dei metodi analitici discussi nella presente tesi comprende la valutazione di specifici parametri tecnici, ossia: Accuratezza, Precisione, Specificità, Limite di rilevabilità, Limite di quantificazione, Linearità, Range. I metodi analitici sono stati sviluppati in HPLC, ossia una tecnica cromatografica che permette di separare composti presenti in un solvente sfruttando l'equilibrio di affinità tra una fase stazionaria, posta all'interno della colonna cromatografica, e una fase mobile che fluisce attraverso essa. I cromatogrammi ottenuti dalle analisi sono quindi stati processati attraverso un software specifico (Empower) e i risultati elaborati e confrontati con i criteri di accettabilità al fine di determinare l'esito della convalida. L'internato di tesi è stato svolto presso il sito di Monza dell'azienda Thermo Fisher Scientific all'interno del gruppo Pharmaceutical Development Service (PDS).