Studio di convalida dei test di carica batterica e micetica in un disinfettante clorossidante in uso nell’industria farmaceutica

Microbiological quality monitoring in the pharmaceutical industry is an important criterion necessary to justify the safe placing of a product on the pharmaceutical market. In pharmaceutical microbiology, there is a need and interest to control the presence of microorganisms that may endanger the process and manufactured products. This is a validation study of the microbial load test on the disinfectant chloride (Surgical Medical Device), a non-mandatorily sterile product in use in Class C and D environments (cleanrooms used to carry out less critical steps in the production of sterile aseptically filled products or as a background for isolators). Disinfectants combine cleaning and disinfection functions on surfaces relatively free of gross contamination; they are used to reduce the number of microorganisms without causing product adulteration. Different types of microorganisms vary in their response to antiseptics and disinfectants due to their different cell structure, composition and physiology. In the present study, 5 test microorganisms were tested according to the European Pharmacopoeia: Staphilococcus aureus, Pseudomoas aeruginosa, Bacillus subtilis, Candida albicans, and Aspergillus brasiliensis. The purpose of the work is to define the operational methods for the validation of the analytical method for the determination of bacterial and fungal load. Total Aerobic Microorganism Count (TAMC) and Total Yeast and Mold Count (TYMC) in samples of the product for disinfectant use. In the validation phase, the analytical parameters to be verified for both bacteria and mycetes were the recovery rate (R) of microorganisms in the presence of product versus that of microorganisms in the absence of product, negative control, and verification of the number of inoculated CFU. In addition, verification of the analysis blank is used to ensure that asepsis conditions are met during the tests performed. Validation tests were conducted on 3 batches of the disinfectant chloride, using the membrane filtration technique. In accordance with the European Pharmacopoeia, the inoculum of the added microbial suspension was less than 100 CFU and its volume did not exceed 1% of the sample volume. The present validation study showed that the disinfectant product does not interfere with the recovery of the microorganisms present, and therefore, the method thus validated can be accepted and performed to monitor batches used in cleaning Class C and D environments.

Il monitoraggio della qualità microbiologica nell'industria farmaceutica è un criterio importante necessario per giustificare l'immissione sicura di un prodotto sul mercato farmaceutico. Nella microbiologia farmaceutica, c'è la necessità e l'interesse di controllare la presenza di microrganismi che possono mettere a rischio il processo e i prodotti fabbricati. Questo è uno studio di convalida del test della carica microbica sul disinfettante clorossidante (Presidio medico chirurgico), prodotto non obbligatoriamente sterile in uso negli ambienti di classe C e D (cleanroom usate per effettuare fasi meno critiche nella produzione di prodotti sterili riempiti asetticamente o come sfondo per isolatori). I disinfettanti combinano funzioni di pulizia e disinfezione su superfici relativamente prive di contaminazioni grossolane, sono utilizzati per ridurre il numero di microrganismi senza causare adulterazione del prodotto. Diversi tipi di microrganismi variano nella loro risposta agli antisettici e ai disinfettanti, in considerazione della loro diversa struttura cellulare, composizione e fisiologia. Nel presente studio sono stati testati 5 microrganismi test in accordo alla Farmacopea Europea: Staphilococcus aureus, Pseudomoas aeruginosa, Bacillus subtilis, Candida albicans, Aspergillus brasiliensis. Lo scopo del lavoro è definire le modalità operative per la convalida del metodo analitico per la determinazione della carica batterica e della carica micetica ovvero Conta Totale dei microrganismi aerobi vivi (TAMC) e Conta Totale di lieviti e muffe (TYMC) in campioni del prodotto ad uso disinfettante. In fase di convalida i parametri analitici da verificare sia per i batteri che per i miceti sono stati la percentuale di recupero (R) dei microrganismi in presenza di prodotto rispetto a quello dei microrganismi in assenza di prodotto, il controllo negativo e la verifica del numero di UFC inoculate. La verifica del bianco d’analisi, inoltre, serve a garantire il rispetto delle condizioni di asepsi durante i test eseguiti. Le prove di convalida sono state condotte su 3 lotti del disinfettante clorossidante, mediante la tecnica di filtrazione su membrana. In accordo alla Farmacopea Europea l’inoculo della sospensione microbica aggiunta è stato inferiore a 100 UFC e il suo volume non ha superato l’1% del volume del campione. Il presente studio di convalida ha dimostrato che il prodotto disinfettante non interferisce con il recupero dei microrganismi presenti e dunque, il metodo così convalidato può essere accettato ed eseguito per monitorare i lotti utilizzati nella pulizia degli ambienti di classe C e D.