The Expression of Cell Adhesion Molecules and Connexins in Endothelial Cells of the Human Umbilical Vein Following Stimulation with Hydrocortisone, Effect of Fat Diet on Peritoneal Macrophages and Stress on the Aortas. Farmacologia dell’Idrocortisone sull’Espressione delle Molecole di Adesione Cellulare e delle Connessine delle Cellule Endoteliali della Vena Ombelicale Umana ed Effetti della Dieta Ipercalorica sui Macrofagi Peritoneali e dello Stress Aortico.

The experimental thesis project involved the study of how stress can influence the formation of atherosclerotic plaques, following three different lines of research. The first research was conducted on human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) to test whether hydrocortisone can affect endothelial dysfunction. To test the hypothesis, the cells were treated with hydrocortisone, following which the variation in the expression of cell adhesion molecules (cams) and connexins in HUVECs was investigated. Cams and connexins are the markers of endothelial dysfunction. The second line of research has been conducted on peritoneal macrophages assuming that if individuals are subject to a long-term high-calorie diet they can alter the expression of macrophage connexins.Mouse models, treated with a high-fat diet, were used to experimentally induce atherosclerosis. The third research focused on the involvement of sympathetic nervous innervation in the atherosclerotic process through the analysis of the heart and aorta through the whole-mount staining technique using TH markers and chat for the autonomic nervous system.

Il progetto di questa Tesi Sperimentale ha riguardato lo studio dei meccanismi fisiopatologici che guidano la formazione e lo sviluppo dell’aterosclerosi, concentrandosi su come l’esposizione a condizioni non fisiologiche richiamino l’attivazione dell’asse ipotalamo-ipofisario culminando con la sintesi dell’ormone dello stress. Per analizzare questa ipotesi, tre linee di ricerca diverse sono state condotte parallelamente. La prima ricerca è stata condotta sulle cellule endoteliali della vena ombelicale umana (HUVECs) per verificare se l'ormone dello stress, indicato come idrocortisone, possa avere un ruolo nell’innesco della disfunzione endoteliale, meccanismo che sottintende i meccanismi fisiopatogenetici dell’aterosclerosi. Per analizzare questa ipotesi, le cellule d’interesse sono state trattate con diverse concentrazioni di idrocortisone al fine di valutare l’attivazione dello stato di quiescenza cellulare. A seguito della somministrazione farmacologica, è stata studiata la variazione nell'espressione di molecole di adesione cellulare (CAMs) e delle connessine nelle HUVECs, i cui elementi sono marcatori rappresentativi della disfunzione endoteliale. La seconda linea di ricerca è stata condotta utilizzando i macrofagi peritoneali nella ipotesi che in individui soggetti a una dieta ipercalorica a lungo termine possa essere alterata l'espressione delle connessine dei macrofagi. Sono stati usati modelli murini, trattati con dieta ad elevato contenuto di grassi, per indurre sperimentalmente l'aterosclerosi. La terza linea di ricerca si è concentrata sul coinvolgimento dell'innervazione nervosa del Sistema Nervoso Autonomo nel processo aterosclerotico tramite l'analisi in fluorescenza dell'aorta utilizzando la tecnica del “whole-mount staining”. I marcatori utilizzati in questo progetto sono stati la Tirosina Idrossilasi e la Colina-Acetil Transferasi.