Caratterizzazione di Nix, gene maschio-specifico in Aedes albopictus

La zanzara tigre Aedes albopictus è la specie di zanzare più invasiva al mondo. Nell’arco degli ultimi 30 anni, si è diffusa, a partire dal suo areale originario nel sud-est asiatico, in tutto il mondo, compresa l’Italia. In virtù del suo potenziale invasivo così elevato e poiché è vettore di numerosi Arbovirus quali Zika, Dengue e Chikungunya, si è reso necessario lo sviluppo di nuovi ed efficaci metodi di controllo delle sue popolazioni. Tali metodi comprendono le Tecnica dell’insetto sterile (SIT) che consiste nell’allevamento massivo in biofabbriche e successiva sterilizzazione di maschi di zanzara che poi verranno rilasciati in natura e potranno contribuire alla riduzione delle dimensioni delle popolazioni naturali. Un aspetto essenziale per l’SIT è sviluppare un metodo di sessaggio precoce. A tale scopo, è indispensabile individuare dei marcatori molecolari sesso-specifici che consentano la discriminazione dei sessi. Questo è però particolarmente complicato perché in questa specie di zanzara, così come in altri membri della famiglia dei Culicini, i cromosomi sessuali sono omomorfi e quindi non distinguibili. A tal proposito, la disponibilità in Ae. egypti di un gene maschio-specifico coinvolto nella determinazione del sesso, ci ha permesso di individuare e caratterizzare in Ae. albopictus l’ortologo di questo gene. Utilizzando un approccio che ha combinato metodi molecolari e citogenetici, nel mio lavoro di tesi ho caratterizzato il corredo cromosomico di Ae. albopictus e caratterizzato il gene Nix tracciandone il profilo di espressione a diversi stadi di sviluppo. Ho caratterizzato la struttura genica di Nix confermando la sua maschio-specificità. nix si è inoltre rilevato un marcatore utile a discriminare i sessi a tutti gli stadi di sviluppo sia a livello di DNA che di RNA. Ho ottimizzato un protocollo di ibridazione in situ fluorescente che mi ha permesso di localizzare Nix sul cromosoma 1 e in particolare nella regione presunta essere coinvolta nella determinazione del sesso. I risultati ottenuti hanno una duplice rilevanza poiché ci permettono di effettuare analisi comparative in relazione ai meccanismi di determinazione del sesso nelle zanzare e inoltre fornire strumenti molecolari utili alla generazione di ceppi di soli maschi utilizzabili per il controllo delle popolazioni naturali.