Validazione pre-clinica di una terapia cellulare avanzata basata sull'impiego di linfociti T citotossici specifici per NPM mutata per la cura delle leucemie mieloidi acute NPM positive.

Acute myeloid leukemia is an hematologic malignancy characterized by clonal expansion of myeloid blasts. Among the different causes of AML, the 50% is due to nucleophosmin 1 gene mutations (NPM1), which brings to an abnormal cytoplasmic expression of protein (NPM). The clinical impact of this mutation is favorable, because patients respond positively to induction therapy and do not need an allogenic transplant. Although it is possible to induce remission, due to NPM-specific autologous cytotoxic T cells response, the outcome is unfavorable caused by disease relapse or relevant toxicity associated to high-intensity pharmacological treatments. T cell therapy, based on AML antigens-specificity, such as nucleophosmin mutations, is an attractive option, specially for patients with favorable prognosis. Therapeutic role of the immunity against AML has been revealed by the graft-versus-leukemia (GVL) effect observed following allo-HSCT. Therapy consist of an ex vivo expansion and infusion of autologous or allogenic NPM mutated-specific T cells. The aim of this experimental thesis has made on pre-clinical validation according to GMP conditions and test the clinical efficacy and safety, in vitro model, to design future multi center clinical trials.

La leucemia mieloide acuta è una neoplasia ematologica caratterizzata dall'espansione clonale di basti mieloidi. Tra le diverse cause di LMA, circa il 50% è dovuto a mutazioni nel gene che codifica per la nucleofosmina 1 (NPM1), che portano ad un'alterata espressione della proteina nel citoplasma (NPM). L'impatto clinico di questa mutazione è nel complesso favorevole, in quanto i pazienti rispondono in maniera positiva alla chemioterapia di induzione e non necessitano di un trapianto allogenico. Nonostante si osservi una remissione completa, dovuta alla risposta autologa dei linfociti T specifica nei confronti di NPM, l'esito è spesso nefasto a causa della recidiva o della tossicità dovuta ai trattamenti farmacologici ad alta intensità. La terapia cellulare basata su linfociti T citotossici specifici per antigeni leucemici, come NPM mutata, rappresenta una valida strategia di cura, in particolare per i pazienti con prognosi favorevole. Il ruolo terapeutico dell'immunità contro la LMA è stato rivelato dal fenomeno della graft versus leukemia (GVL) osservato nei pazienti dopo un trapianto allogenico di cellule staminali. La terapia consiste nell'espansione ex vivo e nella successiva infusione di linfociti T autologhi o allogenici specifici per NPM mutata. Lo scopo di questa tesi sperimentale è stato quello di validare la pre-clinica, in accordo con le condizioni GMP, e verificare in vitro l'efficacia e clinica la sicurezza del trattamento per progettare futuri studi clinici multicentrici.