Identificazione e caratterizzazione di nuovi ligandi di origine naturale dei recettori PPARs mediante SEC-RP-MS e Grating Coupled Interferometry (GCI)

I Peroxisome Proliferator-Activated Receptors (PPARs) sono i recettori attivati dai proliferatori perossisomiali. Appartengono alla superfamiglia dei recettori nucleari e rappresentano il target terapeutico per il trattamento di vari disturbi associati alla sindrome metabolica, come il diabete di tipo 2, la dislipidemia e l’iperglicemia. Dopo anni di interesse marginale, le sostanze naturali stanno tornando ad essere una fonte preziosa per la scoperta di nuovi farmaci. Oggi, infatti, grazie alle strategie di screening di prodotti naturali che sfruttano i più recenti progressi tecnologici, si assiste a un rinnovato interesse nei riguardi di tali prodotti. L’obbiettivo del presente lavoro di tesi è stato quello di identificare nuove molecole che potessero essere affini ai recettori PPARs, a partire da fonti naturali come estratti di piante autoctone. Per conseguire questo risultato è stato utilizzato un approccio di affinity selection-mass spectrometry (AS-MS) che sfrutta la cromatografia ad esclusione molecolare che ha consentito di individuare alcuni ligandi. L’affinità di tali ligandi è stata successivamente confermata mediante grating-coupled interferometry (GCI). Tali studi hanno permesso di confermare la bontà del metodo di fishing di affinità e di ricavare i valori accurati delle costanti di dissociazione tra i composti di interesse e le isoforme recettoriali PPAR alpha e PPAR gamma