Ruolo della regolazione dello splicing di CHK1 nel mantenimento della stabilità genomica in modelli cellulari di SLA

Amyotrophic lateral sclerosis (ALS) is characterized by the accumulation of TDP-43 and mutant FUS in the cytoplasm of motor neurons, leading to DNA damage accumulation. We observed that cytoplasmic inclusions of FUS and TDP-43 reduce CHK1 protein levels in cell lines, patient-derived motor neurons, and a FUS-ALS mouse model. Analyses of CHK1 alternative splicing excluded alterations in splicing regulation as a cause of protein instability. Inhibition of proteasome-mediated protein degradation restored CHK1 levels in cells bearing ALS-associated protein aggregates, reducing DNA damage accumulation.

La sclerosi laterale amiotrofica (SLA) è caratterizzata dall’accumulo di TDP-43 e FUS mutante nel citoplasma dei motoneuroni, con conseguente accumulo di danni al DNA. Abbiamo osservato che le inclusioni citoplasmatiche di FUS e TDP-43 riducono i livelli proteici di CHK1 in linee cellulari, motoneuroni derivati da pazienti e in un modello murino FUS-SLA. Indagini sullo splicing alternativo di CHK1 hanno escluso un’alterazione nella regolazione dello splicing per giustificare la perdita della stabilità della proteina. Esperimenti di inibizione della degradazione delle proteine tramite proteasoma ha ripristinato i livelli di CHK1 nelle cellule con aggregati proteici associati alla SLA riducendo l’accumulo di danno al DNA.