Segnali globali di Ca2+ evocati dall’attivazione dei canali TRPML1 in una linea di endotelio cerebrale umano

La presente tesi di laurea ha indagato i segnali globali di Ca²⁺ evocati dall'attivazione dei canali TRPML1 in una linea di endotelio cerebrale umano. L'obiettivo principale è stato caratterizzare la risposta Ca2+-dipendente mediata dall'attivazione specifica di TRPML1 e comprendere il suo ruolo nella segnalazione cellulare dell'endotelio cerebrale. Per raggiungere questo obiettivo, è stato utilizzato imaging di Ca2+ con il fluorocromo Fura-2 AM, un indicatore ratiometrico altamente sensibile che permette la misurazione accurata della concentrazione intracellulare di Ca²⁺. L'attivazione dei canali TRPML1 è stata indotta specificamente, e i segnali di Ca²⁺ sono stati registrati eccitando le cellule alternativamente a 340 nm e a 380 nm. I risultati hanno dimostrato un aumento significativo dei segnali globali di Ca²⁺ conseguentemente all'attivazione di TRPML1, con risposta dose-dipendente e temporalmente ben definita. L'analisi quantitativa ha rivelato che TRPML1 media un flusso di Ca²⁺ intracellulare cruciale per la segnalazione cellulare. In conclusione, questi dati suggeriscono che TRPML1 gioca un ruolo fondamentale nella segnalazione Ca2+-dipendente dell'endotelio cerebrale, con possibili implicazioni per la fisiologia neurovascolare e potenziali applicazioni nella comprensione di patologie cerebrali associate a disfunzioni del trasporto di Ca2+.