Indagine preliminare sul crosstalk tra piastrine del sangue e una linea cellulare di Glioblastoma Multiforme.

Glioblastoma multiforme (GBM) is the most aggressive primary brain tumor in adults, with a median survival of approximately 12-15 months despite current standard-of-care treatments including surgical resection, radiotherapy, and chemotherapy. Platelets and platelet-derived extracellular vesicles (PEVs) have emerged as important mediators of tumor progression in several cancers, including breast, colon, and pancreatic cancer, contributing to immune evasion, angiogenesis, and tumor cell dissemination. However, whether platelets and PEVs play any role in GBM pathobiology is mostly unknown. In the present study, we used U87MG cells as an established in vitro GBM model to characterize, for the first time, the interaction between platelets, PEVs, and glioblastoma cells. We first demonstrated that U87MG cells are capable of inducing platelet activation and aggregation (TCIPA) in a dose-dependent manner, through canonical signaling pathways involving PLC activation and integrin αIIbβ3. This platelet activation was accompanied by PEV release at quantities comparable to those triggered by thrombin. Using three different and complementary approaches; fluorescence microscopy, flow cytometry, and immunoblotting, we then demonstrated that both thrombin-induced and GBM-induced PEVs efficiently associate with U87MG cells. Finally, assessment of cell viability by Annexin V/propidium iodide staining revealed that PEVs did not significantly affect the proportion of live, apoptotic, or necrotic GBM cells under the tested conditions. These results provide the first evidence of a functional platelet-PEV-GBM axis, suggesting that this interaction may have relevance both for cancer-associated thrombosis and as a potential platform for drug delivery across the blood-brain barrier (BBB), paving the way for future investigations into the role of platelets and PEVs in glioblastoma biology and therapy.

Academic Year 2025/2026 Il glioblastoma multiforme (GBM) è il tumore cerebrale primario più aggressivo negli adulti, con una sopravvivenza mediana di circa 12–15 mesi nonostante i trattamenti standard attualmente disponibili, tra cui la resezione chirurgica, la radioterapia e la chemioterapia. Le piastrine e le vescicole extracellulari piastriniche (PEVs, platelet-derived extracellular vesicles) sono emerse come importanti mediatori della progressione tumorale in diversi tipi di cancro, tra cui il carcinoma mammario, del colon e del pancreas, contribuendo all'evasione immunitaria, all'angiogenesi e alla disseminazione delle cellule tumorali. Tuttavia, il possibile ruolo delle piastrine e delle PEVs nella biologia del GBM non è ancora stato caratterizzato. Nel presente studio, abbiamo utilizzato cellule U87MG come modello consolidato di GBM in vitro per caratterizzare, per la prima volta, l'interazione delle piastrine e delle PEVs con cellule di glioblastoma. Abbiamo innanzitutto dimostrato che le cellule U87MG sono in grado di indurre l'attivazione piastrinica e l'aggregazione (TCIPA, tumor cell-induced platelet aggregation) in maniera dose-dipendente, attraverso vie di segnalazione canoniche che coinvolgono l'attivazione della PLC e l'integrina αIIbβ3. Tale attivazione piastrinica è accompagnata dal rilascio di PEVs in quantità comparabili a quelle indotte dalla stimolazione con il potente agonista fisiologico trombina. Mediante tre approcci differenti e complementari: microscopia a fluorescenza, citometria a flusso e immunoblotting, abbiamo dimostrato che sia le PEVs indotte dalla trombina sia quelle indotte dalle cellule GBM sono in grado di interagire con le cellule U87MG. Infine, la valutazione della vitalità cellulare mediante colorazione con Annessina V e ioduro di propidio ha rivelato che le PEVs non influenzano significativamente la proporzione di cellule vive, apoptotiche o necrotiche nelle condizioni sperimentali testate. Nel complesso, questi risultati forniscono la prima evidenza di un asse funzionale piastrine–PEVs–GBM, suggerendo che tale interazione possa avere rilevanza sia nel contesto della trombosi associata al cancro, sia come potenziale piattaforma per la veicolazione di farmaci attraverso la barriera ematoencefalica, aprendo la strada a future indagini sul ruolo delle piastrine e delle PEVs nella biologia e nel trattamento del glioblastoma.