Studio del ruolo della CD73 nel deficit immunitario dei pazienti in dialisi

Chronic kidney disease (CKD) patients undergoing hemodialysis (HD) face significant clinical complications, including chronic inflammation and immune dysfunction. These pathologies are largely driven by bio-incompatibility and non-selective clearance during extracorporeal circulation. CD73 (ecto-5′-nucleotidase) plays a crucial regulatory role in immune signaling by converting pro-inflammatory extracellular AMP into anti-inflammatory adenosine. While dysregulated purinergic signaling and altered CD73 activity are implicated in renal pathology, CD73 dynamics in chronic hemodialysis remain incompletely understood. We investigated the role of CD73 and purinergic signaling in systemic alterations secondary to chronic hemodialysis. Gene expression study using real-time quantitative PCR (RT-qPCR) and protein levels of CD73 by ELISA were evaluated in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) from hemodialysis patients and compared with healthy control subjects. RT-qPCR analysis revealed a significant upregulation of relative CD73 gene expression in PBMCs from HD patients compared to healthy controls (p < 0.01). Conversely, ELISA measurements showed that CD73 protein levels were significantly decreased in the PBMCs of HD patients relative to controls (p < 0.05). This inverse relationship points to underlying post-transcriptional or post-translational dysregulation of CD73 in HD patients, which may contribute to the persistent inflammation and immune dysfunction observed during maintenance of hemodialysis. Furthermore, statistical correlations were conducted to analyze associations between NT5E/CD73 levels and clinical/biochemical parameters. The major finding suggests a strong positive correlation of NT5E expression with BMI and an inverse correlation with CRP, whereas the CD73 protein levels were strongly negatively correlated to lymphocytes and CRP in HD patients. On the contrary, in healthy subjects, NT5E gene expression was significantly and positively correlated with CD73 protein levels and both NT5E expression and CD73 protein levels showed significant negative correlations with age, indicating lower CD73/NT5E levels with increasing age.

I pazienti affetti da malattia renale cronica (MRC) sottoposti a emodialisi (HD) vanno incontro a significative complicanze cliniche, tra cui infiammazione cronica e disfunzione immunitaria. Tali patologie sono in gran parte causate dalla bio-incompatibilità e dalla clearance non selettiva durante la circolazione extracorporea. La CD73 (ecto-5′-nucleotidasi) svolge un ruolo regolatorio cruciale nella segnalazione immunitaria, convertendo l'AMP extracellulare pro-infiammatorio in adenosina anti-infiammatoria. Sebbene la segnalazione purinergica deregolata e l'alterata attività della CD73 siano coinvolte nella patologia renale, le dinamiche della CD73 nell'emodialisi cronica non sono ancora del tutto chiarite. Abbiamo studiato il ruolo della CD73 e della segnalazione purinergica nelle alterazioni sistemiche secondarie all'emodialisi cronica. Sono stati valutati l'espressione genica mediante RT-qPCR (real-time quantitative PCR) e i livelli proteici della CD73 tramite ELISA nelle cellule mononucleate del sangue periferico (PBMC) di pazienti in emodialisi, confrontandoli con quelli di soggetti sani di controllo. L'analisi RT-qPCR ha rivelato una significativa sovra-regolazione dell'espressione genica relativa della CD73 nei PBMC dei pazienti in HD rispetto ai controlli sani (p < 0,01). Per contro, le misurazioni ELISA hanno mostrato una significativa riduzione dei livelli proteici di CD73 nei PBMC dei pazienti in HD rispetto ai controlli (p < 0,05). Questa relazione inversa suggerisce una sottostante deregolazione post-trascrizionale o post-traduzionale della CD73 nei pazienti in HD, che potrebbe contribuire all'infiammazione persistente e alla disfunzione immunitaria osservate durante il trattamento emodialitico di mantenimento. Inoltre, sono state effettuate analisi statistiche per valutare le associazioni tra i livelli di NT5E/CD73 e i parametri clinico-biochimici. Il risultato principale indica una forte correlazione positiva tra l'espressione di NT5E e l'IMC (BMI) e una correlazione inversa con la PCR, mentre i livelli proteici di CD73 sono risultati fortemente correlati in modo negativo con la conta linfocitaria e la PCR nei pazienti in HD. Al contrario, nei soggetti sani, l'espressione genica di NT5E è risultata significativamente e positivamente correlata ai livelli proteici di CD73; inoltre, sia l'espressione di NT5E che i livelli proteici di CD73 hanno mostrato significative correlazioni negative con l'età, indicando una riduzione dei livelli di CD73/NT5E all'aumentare dell'età.